使用
體細(xì)胞計(jì)數(shù)儀檢測(cè)生乳的方法是那些，在檢測(cè)過程當(dāng)中需要使用到這些物品，這些物品的重要性是什么，在檢測(cè)時(shí)有哪些需要注意的問題，下面仁創(chuàng)電子小編隊(duì)為大家講解!
1.1原理
將測(cè)試的鮮乳施加到載玻片上以形成膜，干燥，染色，并在顯微鏡下計(jì)數(shù)其細(xì)胞被亞甲藍(lán)清楚染色的細(xì)胞。
1.2儀器和試劑
(1)儀器
顯微鏡：放大倍率╳500或╳1000，配有帶刻度的目鏡，千分尺和機(jī)械表;微量注射器;滑動(dòng);水浴;電爐砂芯漏斗電吹風(fēng);
(2)試劑
95%乙醇，四氯乙烷或三氯乙烷，亞甲基藍(lán)，冰醋酸，硼酸。
1.3污漬準(zhǔn)備
向250 ml燒瓶中加入54 ml乙醇和40 ml四氯乙烷，并搖勻。將混合物在65℃水浴中加熱3分鐘，取出后，加入0.6g亞甲藍(lán)，并將混合物均勻混合。冷卻后，將其置于冰箱中冷藏。取出后，加入6毫升冰醋酸，混合均勻，用砂芯漏斗過濾，然后將其放在室溫下的試劑瓶中進(jìn)行儲(chǔ)存。
1.4樣品制備
(1)收集的生乳應(yīng)保存在2-6°C下。如果在6小時(shí)內(nèi)未測(cè)量，則應(yīng)添加硼酸以防止腐蝕。樣品中的硼酸濃度不超過0.6 g / 100 mL。在沒有冷藏條件(2-6°C)下存儲(chǔ)不超過24小時(shí)。
(2)將原料奶在35°C水浴中加熱5分鐘，混合并冷卻至室溫以防止樣品不均勻，例如脂肪漂浮。
(3)用乙醇洗滌玻片后，用鏡紙干燥，用火焰烘烤，然后冷卻至室溫。
(4)通過微量注射取0.01ml樣品，并將樣品均勻地注射到周圍的載玻片上，立即置于培養(yǎng)箱中，并水平放置5分鐘以形成均勻厚度的膜。在電爐上烘烤干燥，將干燥后的樣品膜在碎片上浸入染色溶液中10分鐘，取出并干燥。將染色的樣品膜浸入水中以洗去殘留的染料溶液，然后干燥并以防塵方式儲(chǔ)存。
1.5樣品測(cè)定
(1)將載玻片固定在顯微鏡的載物臺(tái)上，使用自然光或通過電光源，聚光鏡和油浸大功率鏡來增加透射光的強(qiáng)度。
(2)單向移動(dòng)式機(jī)械站對(duì)每個(gè)視野中的載玻片上的染色體細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，并且落入視野內(nèi)或視野中身體一半以上的體細(xì)胞用于計(jì)數(shù)，并且計(jì)數(shù)的體細(xì)胞數(shù)量不少于400。(有關(guān)詳細(xì)信息，請(qǐng)參閱NY / T 800-2004)
2,流式細(xì)胞儀
流式細(xì)胞儀(FCM)是一項(xiàng)在1970年代開發(fā)的技術(shù)，可以快速，準(zhǔn)確和客觀地檢測(cè)和量化單個(gè)顆粒(通常是細(xì)胞)的多種特征。乳品行業(yè)主要使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)牛奶中的體細(xì)胞和細(xì)菌總數(shù)。
流式細(xì)胞儀是一種結(jié)合了激光技術(shù)，電子物理技術(shù)，光電測(cè)量技術(shù)，電子計(jì)算機(jī)和細(xì)胞熒光化學(xué)技術(shù)的新型高科技儀器。
其結(jié)構(gòu)一般分為三部分：樣品室和液流驅(qū)動(dòng)系統(tǒng);激光光源和光學(xué)系統(tǒng);信號(hào)檢測(cè)，存儲(chǔ)，數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。
3,CMT診斷解決方案
CMT主要用于快速診斷患有隱性乳腺炎的泌乳牛，常規(guī)監(jiān)測(cè)泌乳牛的乳房健康，篩查泌乳性母牛隱性乳腺炎的發(fā)生率以及評(píng)估新鮮牛奶衛(wèi)生的質(zhì)量水平。
原理是在表面活性劑和堿性藥物的作用下，牛奶中的體細(xì)胞被破壞，DNA被釋放以進(jìn)一步起作用以沉淀或形成凝膠。體細(xì)胞越多，產(chǎn)生的沉淀或凝膠就越多，從而間接診斷出乳腺炎和炎癥的程度。該方法是國際公認(rèn)的隱性乳腺炎的診斷方法，其特點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便，速度快。
1.使用方法
(1)從要檢查的牛奶區(qū)域取樣，丟棄前兩個(gè)牛奶，將牛奶樣品擠入檢查杯中。
(2)傾斜測(cè)試盤(約60°C)，丟棄多余的牛奶，然后在杯子中測(cè)試約2 ml的牛奶樣品。
(3)將2毫升用于奶牛的診斷試劑(稀釋劑)添加到每個(gè)測(cè)試杯中。
(4)搖動(dòng)水平同心圓并搖動(dòng)10-30秒，以將牛奶樣品與母牛診斷試劑充分混合。
2.評(píng)審標(biāo)準(zhǔn)
CMT與牛奶充分混合后，根據(jù)是否存在聚集體以及聚集體的量和性質(zhì)進(jìn)行判斷。
負(fù)號(hào)(-)：細(xì)胞數(shù)為0-20,000 / ml：混合物為液體形式。當(dāng)測(cè)試盤傾斜時(shí)，液體會(huì)平穩(wěn)移動(dòng)，并且杯底沒有沉淀物。
可疑(±)：細(xì)胞數(shù)為15-500,000 / ml：混合物為液體形式。當(dāng)測(cè)試盤傾斜時(shí)，杯底會(huì)出現(xiàn)少量沉淀物，沉淀即刻消失.
弱陽性(+)：細(xì)胞數(shù)量為40-150萬/ ml：杯底出現(xiàn)少量稀薄的粘稠沉淀物，但不是凝膠狀的。當(dāng)測(cè)試盤傾斜時(shí)，沉積物會(huì)散布在培養(yǎng)皿的底部，并具有一定的附著力。
陽性(++)：細(xì)胞數(shù)量為80-500百萬/ ml：杯子底部的沉淀物更多，也更厚，并且凝膠量少。當(dāng)測(cè)試盤傾斜時(shí)，沉淀物會(huì)附著在杯子的底部。它很難流動(dòng)，并且在搖動(dòng)巖石時(shí)，沉淀物會(huì)出現(xiàn)居中現(xiàn)象。
強(qiáng)陽性(+++)：細(xì)胞數(shù)超過500萬/ ml：當(dāng)測(cè)試盤放置在培養(yǎng)皿中時(shí)，培養(yǎng)皿中的大多數(shù)或全部混合物形成透明的凝膠狀聚集體，幾乎完全粘附在培養(yǎng)皿底部旋轉(zhuǎn)時(shí)，聚集體集中。該組很難散布。
酸性牛奶(y)：牛奶呈黃色和酸敗，這是乳腺炎。
堿性牛奶(P)：牛奶為深紫色，伴隨著牛奶產(chǎn)量減少，這是乳腺炎;當(dāng)堿與牛奶混合時(shí)，牛奶很容易變成深紫色。
4,電導(dǎo)率法
牛奶的電導(dǎo)率與組成有關(guān)，尤其是氯化物和乳糖的含量。當(dāng)牛奶中的氯離子含量增加或乳糖含量減少時(shí)，牛奶的電導(dǎo)率就會(huì)增加。
普通牛奶的電導(dǎo)率通常在20°C下為0.004-0.005S，如果超過0.006S，則被認(rèn)為是病牛奶。
電導(dǎo)率乳腺炎測(cè)試儀
由于牛奶中含有鹽，因此具有導(dǎo)電性。牛奶中的離子量會(huì)影響電導(dǎo)率，其中最重要的是鈉，鉀和氯。
當(dāng)牛乳糖缺乏或乳腺炎由于乳酸或鹽的產(chǎn)生而增加時(shí)，電導(dǎo)率高于正常牛奶。因此，電導(dǎo)率可用于間接檢測(cè)乳腺炎牛奶。
5,粘度法
牛奶的粘度在20°C為0.0015-0.0020Pa.s。影響牛奶粘度的內(nèi)在因素是牛奶中脂肪和蛋白質(zhì)的含量。當(dāng)脂肪和蛋白質(zhì)含量高時(shí)，牛奶的粘度也高。干物質(zhì)含量越高，牛奶的粘度越大。它會(huì)受到脫脂，滅菌和均質(zhì)化的影響。
體細(xì)胞計(jì)數(shù)儀,同時(shí)，牛奶的粘度也受溫度影響，并且當(dāng)溫度升高時(shí)粘度降低。溫度低于60℃時(shí)，溫度越高，粘度越小。當(dāng)溫度高于60℃時(shí)，蛋白質(zhì)變性，并且溫度越高，粘度越大。
另外，牛初乳，終端乳和病乳的粘度高于普通乳。因此，通過檢測(cè)粘度可以間接反映體細(xì)胞的數(shù)量。
6,熒光光電計(jì)數(shù)
1.工作原理：
將原料奶中的體細(xì)胞進(jìn)行熒光染色，在特殊的熒光作用下通過一系列透鏡和濾光片進(jìn)行處理，然后投射到透鏡中，然后對(duì)樣品進(jìn)行拍照，讀取，分析和顯示。
其特點(diǎn)如下：
(1)可操作性高：易于操作，易于使用，結(jié)果準(zhǔn)確，操作人員經(jīng)過簡(jiǎn)單培訓(xùn)即可上崗。
(2)安全性：一次性微流控芯片可減少交叉污染的風(fēng)險(xiǎn)。
(3)圖像顯示：實(shí)時(shí)顯示體細(xì)胞分布圖像。
(4)支持軟件：儀器內(nèi)置的統(tǒng)計(jì)軟件可以自動(dòng)存儲(chǔ)和分析測(cè)試數(shù)據(jù)。
以上就是安徽仁創(chuàng)電子科技信息中心介紹有關(guān)于使用
體細(xì)胞計(jì)數(shù)儀檢測(cè)生乳的方法，希望大家看完這篇文章能夠有所了解，如果大家還有不懂的，歡迎大家來咨詢我們。
