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體細(xì)胞計數(shù)儀檢測細(xì)胞時有哪些問題?通過制備組織勻漿或細(xì)胞懸浮液并用熒光染料染色,可以通過流式細(xì)胞術(shù)計數(shù)不同DNA含量或倍數(shù)的細(xì)胞數(shù)。那么就用體細(xì)胞計數(shù)儀檢測細(xì)胞有哪些問題,在檢測過程當(dāng)中應(yīng)該注意那些問題呢?
體細(xì)胞計數(shù)儀
例如,在睪丸組織中,精子細(xì)胞是單倍體細(xì)胞,精原細(xì)胞,支持細(xì)胞,細(xì)胞和其他非精子細(xì)胞是二倍體細(xì)胞,初級精母細(xì)胞,精原細(xì)胞和非分裂細(xì)胞。生精細(xì)胞是四倍體細(xì)胞。因此,利用體細(xì)胞計數(shù)儀確定各級睪丸組織中生精細(xì)胞DNA倍性的變化,可間接決定不同生精細(xì)胞相對比例的變化趨勢。
但是,在使用這些結(jié)果得出結(jié)論時,必須謹(jǐn)慎。例如,單倍體細(xì)胞百分比的降低可能表明精子細(xì)胞數(shù)量減少,但以下幾個條件也可能導(dǎo)致百分比降低:
第一,單倍體細(xì)胞的數(shù)量不變,其他倍性細(xì)胞的數(shù)量增加;
第二,單倍體細(xì)胞的數(shù)量減少,其他倍性細(xì)胞的數(shù)量也減少,但減少相對較小。
第三,單倍體細(xì)胞數(shù)量增加,其他倍性細(xì)胞數(shù)量也相對增加和增加;
第四,這種百分比變化可能表明精子發(fā)生不受影響,但在兩種情況下也可能發(fā)生這種情況:單倍體細(xì)胞和其他倍性細(xì)胞按比例增加;單倍體細(xì)胞和其他倍性細(xì)胞按比例減少。
第五,無論在組織勻漿期間細(xì)胞的準(zhǔn)確鑒定和細(xì)胞粉碎,流式細(xì)胞術(shù)估計細(xì)胞數(shù)量存在至少一個缺陷。
第六,通常僅反映細(xì)胞的相對數(shù)量比,但不能確定測量的細(xì)胞。感興趣區(qū)域的總數(shù)是否真的增加,減少或不變。